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北京中因科技有限公司张凡获国家专利权

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龙图腾网获悉北京中因科技有限公司申请的专利诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115305239B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2026-04-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202110493801.6,技术领域涉及:C12N5/079;该发明授权诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法是由张凡;曾露颖;乔静;陈邵宏;赵宇设计研发完成,并于2021-05-07向国家知识产权局提交的专利申请。

诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法在说明书摘要公布了:本申请涉及一种诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞RPE的方法,其包括以下步骤:在多能干细胞经细胞培养出现细胞状态衰退前,将所述多能干细胞置于第一培养基中培养,其中所述第一培养基包含DMEM培养基、血清、β‑巯基乙醇、非必需氨基酸NEAA和L‑谷氨酰胺。本申请所述的方法可以显著提高分化为RPE的效率。

本发明授权诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法在权利要求书中公布了:1.一种诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞RPE的方法,其包括以下步骤: 1细胞培养前1天:当干细胞iPS培养至细胞融合率70%时,将iPS细胞消化成小团块,离心后按照1:2-1:4的比例将细胞铺种到包被有Matrigel的培养板上, 加入第二培养基:DMEM培养基F12、1×B27细胞培养添加剂、1×N2细胞培养添加剂和1×非必需氨基酸NEAA,放置于培养箱中培养过夜培养; 2细胞培养第0-1天:去除细胞上清,更换为第二培养基-1:DMEM培养基F12、1×B27细胞培养添加剂、1×N2细胞培养添加剂、1×非必需氨基酸NEAA、50ngmL人头蛋白Noggin、10ngmLDKK1蛋白、10ngmL胰岛素样生长因子-1IGF-1和10mM烟酰胺NIC或5mM3-氨基苯甲酰胺3ABA,培养两天,每天更换培养液; 3细胞培养第2-3天:去除细胞上清,更换为第二培养基-2:DMEM培养基F12、1×B27细胞培养添加剂、1×N2细胞培养添加剂、1×非必需氨基酸NEAA、10ngmL人头蛋白Noggin、10ngmLDKK1蛋白、10ngmL胰岛素样生长因子-1IGF-1、5ngmlbFGF和10mM烟酰胺NIC或5mM3ABA,培养两天,每天更换培养液; 4细胞培养第4-5天:去除细胞上清,更换为第二培养基-3:DMEM培养基F12、1×B27细胞培养添加剂、1×N2细胞培养添加剂、1×非必需氨基酸NEAA、10ngmLDKK1蛋白、10ngmL胰岛素样生长因子-1IGF-1和100ngmLActivinA,培养两天,每天更换培养液; 5细胞培养第6-15天:将第二培养基-3更换为第一培养基:KnockOutTMDMEM、20%KnockOutTM血清替代物、0.5%β-巯基乙醇、1%NEAA、1%L-谷氨酰胺,在使用第一培养基培养6-10天后,向第一培养基中进一步加入:100ngmLActivinA以及10μMSU5402; 6细胞培养第21-28天:将细胞消化成单细胞,通过单细胞过滤器去除细胞中非RPECells形态的细胞,以达到RPE细胞的纯化,将细胞接种到包被有Matrigel的组织培养板上或者Transwell膜上,纯化后的细胞在所述第一培养基中培养,每隔两天换一次培养液,培养至所述细胞培养的第27天可见具有高纯度典型形态的成熟RPE细胞。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人北京中因科技有限公司,其通讯地址为:102206 北京市昌平区科技园区生命园路9号院1号楼S-402;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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